Розробка біотехнології виробництва гідролітичного ферментного препарату з а-галактозидазною активністю
Вантажиться...
Дата
2003
Автори
Назва журналу
Номер ISSN
Назва тому
Видавець
ОНАХТ
Анотація
Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата технічних наук за спеціальністю
03.00.20 - біотехнологія.
Дисертацію присвячено розробці виробництва гідролітичного ферментного препарату з a-галактозидазною активністю.
Основними задачами роботи було: вивчення різних методів виділення, очищення, концентрування і сушіння ферментного препарату; визначення впливу різних фізико-хімічних показників на активність ферменту; ідентифікація функціонально каталітичних груп активного центра ферменту; механізм дії ферменту, дослідження процесу гідролізу соєпродуктів із використанням отриманого ферментного препарату; розробка принципово технологічної схеми виробництва гідролітичного ферментного препарату Галактолонгін Г10х та її промислова апробація.
Вивчено динаміку росту культури Bifidobacterium longum на різних живильних середовищах та обрано оптимальне живильне середовище для подальшого культивування даної культури. Оптимальними за накопиченням біомаси були визнані середовище MRS і соєва сироватка.
Вивчено вплив природи трьох органічних розчинників (ацетону, етанолу, ізопропанолу) та їх концентрації на процес виділення a-галактозидази з культуральної рідини.
Експериментально доведено можливість застосування ультрафільтрації для концентрування й очищення культуральної рідини, що містить культуру B.longum.
Диссертация на соискание научной степени кандидата технических наук по специальности 03.00.20 - биотехнология. Диссертация посвящена разработке производства гидролитического ферментного препарата с а-галактозидазной активностью. Основными задачами работы являлись: изучение различных методов выделения, очистки, концентрирования и сушки ферментного препарата; влияние различных физико-химических показателей на активность фермента; идентификация функционально каталитических групп активного центра фермента; механизм действия фермента, исследование процесса гидролиза соепродуктов с использованием полученного ферментного препарата; разработка принципиальной технологической схемы производства гидролитического ферментного препарата Галактолонгин Г10х и ее промышленная апробация. Изучена динамика роста культуры Bifidobacterium longum на различных питательных средах и выбрана оптимальная питательная среда для дальнейшего культивирования данной культуры. Оптимальными по накоплению биомассы были выбраны среда MRS и соевая сыворотка. Выбран оптимальный параметр дезинтеграции клеточной стенки культуры B.longum длительность равная 10 мин. Изучено влияние природы 3-х органических растворителей (ацетона, этанола, изопропанола) и их концентрации на процесс выделения a-галактозидазы из культуральной жидкости. Органические растворители при добавлении их к 1 объему культуральной жидкости 2-х объемов увеличивают удельную активность фермента от 7,8 ед./мг до 13,8 ед./мг белка, достигая степени очистки в 1,3-2,3 раза. Экспериментально доказана возможность применения ультрафильтрации для концентрирования и очистки культуральной жидкости содержащей культуру B.longum.
The thesіs for candіdates degree of technical sciences for specialty 03.00.20 - biotechnology. The thesіs іs devoted to the development of the technology of hydrolysіs enzyme wtih a-galactosіdase activtiy. Determination of the characteristic of Bіfіdobacterіum longum culture, whіch can be both a starter culture and the source of the enzyme was done. Cultivation was carried out in the medium of MRS broth. As this enzyme іs intracellular, the conditions of desintegration of the cells on the desintegrator UZDN-A were investigated. The optіmum condіtіons are duration - 10 min. The activtiy of our enzyme was measured by the method of Church. The maximum activtiy of a-D-galactosіdase was 8,8-9,0 EA/mg of protein. Influence of pH, temperature, thermal stability, storage stabіlіty of the enzyme, effect of metal ions, inhibitors and other substances on enzyme activity has been investigated. It has been shown, that the maximum activtiy of a-D-galactosіdase іs dіsplayed under pH 6,0 and temperature 43-48 °C. The іdentіfіcatіon of functіonal catalytic groups of the enzyme active center was done. The conditions of the fermentative hydrolysіs of soybean products by the enzyme have been investigated. The optimum conditions of the hydrolysіs which allow to carry out breaking up of soybean galactooligosaccharides by 98 % have been chosen. Determine all these properties of our enzyme we understood that, this enzyme allows us to use it as a starter culture for a soybean product. Besides, the strong stability of the enzyme at low temperatures would permit continuation of hydrolysis of the non-digestible galactooligosaccharides throughout the shelf-life of the fermented product.
Диссертация на соискание научной степени кандидата технических наук по специальности 03.00.20 - биотехнология. Диссертация посвящена разработке производства гидролитического ферментного препарата с а-галактозидазной активностью. Основными задачами работы являлись: изучение различных методов выделения, очистки, концентрирования и сушки ферментного препарата; влияние различных физико-химических показателей на активность фермента; идентификация функционально каталитических групп активного центра фермента; механизм действия фермента, исследование процесса гидролиза соепродуктов с использованием полученного ферментного препарата; разработка принципиальной технологической схемы производства гидролитического ферментного препарата Галактолонгин Г10х и ее промышленная апробация. Изучена динамика роста культуры Bifidobacterium longum на различных питательных средах и выбрана оптимальная питательная среда для дальнейшего культивирования данной культуры. Оптимальными по накоплению биомассы были выбраны среда MRS и соевая сыворотка. Выбран оптимальный параметр дезинтеграции клеточной стенки культуры B.longum длительность равная 10 мин. Изучено влияние природы 3-х органических растворителей (ацетона, этанола, изопропанола) и их концентрации на процесс выделения a-галактозидазы из культуральной жидкости. Органические растворители при добавлении их к 1 объему культуральной жидкости 2-х объемов увеличивают удельную активность фермента от 7,8 ед./мг до 13,8 ед./мг белка, достигая степени очистки в 1,3-2,3 раза. Экспериментально доказана возможность применения ультрафильтрации для концентрирования и очистки культуральной жидкости содержащей культуру B.longum.
The thesіs for candіdates degree of technical sciences for specialty 03.00.20 - biotechnology. The thesіs іs devoted to the development of the technology of hydrolysіs enzyme wtih a-galactosіdase activtiy. Determination of the characteristic of Bіfіdobacterіum longum culture, whіch can be both a starter culture and the source of the enzyme was done. Cultivation was carried out in the medium of MRS broth. As this enzyme іs intracellular, the conditions of desintegration of the cells on the desintegrator UZDN-A were investigated. The optіmum condіtіons are duration - 10 min. The activtiy of our enzyme was measured by the method of Church. The maximum activtiy of a-D-galactosіdase was 8,8-9,0 EA/mg of protein. Influence of pH, temperature, thermal stability, storage stabіlіty of the enzyme, effect of metal ions, inhibitors and other substances on enzyme activity has been investigated. It has been shown, that the maximum activtiy of a-D-galactosіdase іs dіsplayed under pH 6,0 and temperature 43-48 °C. The іdentіfіcatіon of functіonal catalytic groups of the enzyme active center was done. The conditions of the fermentative hydrolysіs of soybean products by the enzyme have been investigated. The optimum conditions of the hydrolysіs which allow to carry out breaking up of soybean galactooligosaccharides by 98 % have been chosen. Determine all these properties of our enzyme we understood that, this enzyme allows us to use it as a starter culture for a soybean product. Besides, the strong stability of the enzyme at low temperatures would permit continuation of hydrolysis of the non-digestible galactooligosaccharides throughout the shelf-life of the fermented product.
Опис
Петросьянц, А. П.
Розробка біотехнології отримання гідролітичного ферментного препарату з а-галактозидазною активністю [Текст] : автореф. дис. ... канд. техн. наук : спец. 03.00.20 "Біотехнологія" / Петросьянц Арсен Педросович ; наук. кер. Л. В. Капрельянц ; Одес. нац. акад. харч. технологій. – Одеса : ОНАХТ, 2003. – 20 с.
Ключові слова
продукт, культивування, дезінтеграція, а-галактозидазна активність, біфідобактерії, соєві галактоолігосахариди, біотехнологія, продукт, культивирование, дезинтеграция, а-галактозидазная активность, бифидобактерии, соевые галактоолигосахариды, биотехнология, product, cultivation, desintegration, a-galactosidase activity, bifidobacterium, soy galactooligosaccharides, biotechnology